切片的注意事項
來源:http://www.sirmma.com/news/523.html 發布時間:2021-04-02 點擊:1142
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今天小編為你解析:
1 . 取材
取材的好壞,直接影響切片的質量。醫生在取材時,首先要有一把鋒利的取材刀,在切割組織時要避免取材刀來回拖拉,切取的組織塊厚薄要均勻,一般厚度以0.2 ~0.3cm 為適,較容易發脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結、大塊癌組織等可適當厚一點,而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織應取薄一些;淋巴結應修掉兩側球冠,并盡量剔除周圍的脂肪組織。在取材中還應十分注意組織內是否有縫線或骨組織,如碰到不可避免的鈣化組織,應與技術室講明,在切取纖維組織、肌肉組織、胃腸道時,應注意纖維及肌肉的走向,取材時盡可能按與纖維平行走向切取為佳。
2 . 固定
固定是技術室工作的一步,也是在整個制片過程中無法補救的一步。所謂“固定”,就是組織離體后,用各種辦法使其細胞內的物質盡量接近其生活狀態時的形態結構和位置的過程。固定的目的是為了防止組織細胞自溶與腐敗,防止了細胞內的酶對蛋白質的分解作用,使細胞內的各種成分如蛋白質、脂肪、碳水化合物或酶類轉變為不溶性物質,以保持原有的結構與生活時相仿。另外,組織固定后,均呈一定的硬化狀態,增加組織韌性,而且不易變形,有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時固定,固定液的量應為組織的5 倍。固定的關鍵主要與固定的及時性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時間有關。常用的固定液為10%福爾馬林。筆者認為,10%福爾馬林由于受到福爾馬林的質量、使用時的揮發和取材時帶入的水分影響,濃度被降低致組織固定不足,而高濃度的福爾馬林,降低了對組織的穿透性,形成周圍固定好而中央固定不到的現象。通過實踐,本人認為以酸性12~15%的福爾馬林。大標本(2cm 厚)一般需要6~12個小時,小標本一般需要3~6 個小時;當室溫低18℃時,可在37℃以下的溫箱內加溫4~6 個小時。由于HE 染色著色PH為3.5~4.5, 中性福爾馬林對蘇木素染色有一定影響,細胞核容易發灰,核染色質不佳。
所以, 盡管中性福爾馬林對抗原有很好的保存作用,但酸性福爾馬林對絕大多數抗原來說也有很好的保存作用,所以在沒有特別處理的情況下常規HE 用12~15%酸性福爾馬林也可以(每100毫升12~15%福爾馬林液內加5毫升冰醋酸)。骨髓、結締組織固定以Bouin 液為佳,經Bouin 液固定后的組織必須流水沖洗4 小時以上。有條件的單位可根據不同要求選用二種或二種以上的固定液;少數單位還可建立組織冷凍庫,以便適應各種特殊的處理要求。
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